(495) 437-33-77    info@tomoscan.ru    карта сайта
 
НОВОСТИ О НАС ПУБЛИКАЦИИ СОТРУДНИЧЕСТВО КОНТАКТЫ
   CAD/CAM стоматология
   3D профилометрия
   Микроскопия
   Томография
   Интерферометрия

Микроскопия
      Интерференционные измерения (статья)


Интерференционные измерения (статья)

Интерференционные методы измерений интегральных и локальных параметров фазовых микрообъектов

Фазовые микрообъекты, прозрачные для излучения видимого оптического диапазона, широко распространены как в промышленности, так и в биологии и медицине. К ним относятся различные полимерные пленки, кристаллы, оптические микродетали, оптоволоконные изделия и, наконец, биологические микрообъекты – клетки и др. Эти объекты описываются трехмерным (3D) пространственным распределением показателя преломления n (x, y ,z), с которым связаны плотность, температура, концентрация и другие физические параметры объекта [1].

При изучении фазовых объектов сразу возникает задача их визуализации. На сегодняшний день она решена. Широко известны следующие методы: фазовый контраст (метод Цернике), интерференционный контраст, дифференциально-интерференционный контраст (метод Номарского, DIC), метод темного поля, поляризационный контраст и пр. [2]. Однако в настоящее время при исследовании фазовых микрообъектов требуется не только наблюдать и оценивать различные геометрические параметры (площадь, периметр), но и проводить измерения их локальных и интегральных характеристик.

Исходным измеряемым параметром фазового объекта является оптическая разность хода (ОРХ). Это интегральная характеристика, так как ОРХ представляет собой интеграл от функции распределения показателя преломления вдоль луча или одномерную (1D) луч-сумму. Двумерное (2D) распределение ОРХ, полученное вдоль набора параллельных лучей, является параллельной 2D - проекцией, а вдоль набора лучей, пересекающихся в одной точке – конической 2D - проекцией. Будем далее называть 2D распределение ОРХ фазовым изображением. По набору значений ОРХ, измеренных при различных углах зондирования, можно реконструировать 3D - пространственное распределение показателя преломления n (x, y, z) – локальный по пространству параметр фазового объекта. Из ОРХ и 3D - распределения n(x, y, z) могут быть вычислены различные производные характеристики, от этих величин:

  • плотность [1];
  • концентрация [1];
  • морфометрические характеристики, например объем, средний радиус, площадь клетки и т. п. [3];
  • масса сухих веществ биологической клетки [4] (в [5] показана связь между оптической разностью хода света, прошедшего через клетку, и массой ее сухого вещества, а в [6, 7] – возможность ее измерения с помощью интерференционного микроскопа);
  • величина двулучепреломления (ДЛП) (традиционно измеряемый поляризационными методами, показатель ДЛП может быть измерен интерференционно-поляризационным методом, который выгодно отличается от аналогичных поляризационных методов отсутствием необходимости измерения толщины исследуемого объекта [8] ).
  • Показатель преломления связан с поляризуемостью белковых структур клетки, следовательно, фазовое изображение несет ценную диагностическую информацию о состоянии биологического микрообъекта. Поэтому с помощью интерференционного микроскопа можно вести мониторинг состояния как отдельной клетки [9], так и целой популяции клеток [10]. Это может быть использовано, например, для диагностики состояния системы крови [10].

    Корреляция между различными процессами, происходящими в живой клетке, и величиной ОРХ позволяет использовать фазовое изображение также для исследования этих динамических процессов [11].

    Количественные исследования характеристик фазовых микрообъектов можно проводить только с помощью интерференционных микроскопов [12]. Только они позволяют измерять ОРХ. Другие способы позволяют лишь визуализировать, либо измерять производную по направлению от ОРХ (DIC). Однако, широкому распространению интерференционных микроскопов препятствовало отсутствие автоматизированных методов расшифровки интерферограмм, что тормозило внедрение данных микроскопов в практику лабораторных исследований и рутинных измерений.

    Для проведения измерений в основном используют микроскопы, в основе которых лежат различные схемы двулучевых интерферометров Майкельсона, Маха-Цендера и Миро [12]:

    • схема деления пучков Майкельсона используется в микроинтерферометре академика В.П. Линника (1933). Микроскоп Линника позволяет работать с микрообъективами больших числовых апертур. Для исследования фазовых микрообъектов, они должны размещаться на зеркале, расположенном в предметном канале. В этом случае излучение дважды проходит сквозь них (схема на отражение) [12].
    • схема деления пучков Маха-Цендера используется в микроскопе Хорна (Horn, 1950). В своем составе он имеет две идентичные ветви, в которых располагаются исследуемый препарат и препарат сравнения. Излучение проходит через исследуемый микрообъект один раз (схема на просвет) [12].
    • схема деления пучков по Миро используется в микроскопе Дайсона (Dyson, 1950; Pfeiffer, 1954). Пучок сравнения и предметный пучок формируются путем деления по амплитуде исходного пучка. Недостатком этой схемы является значительная потеря света и рассеянный свет, возникающие вследствие многих отражений. Данная схема также предназначена для исследования фазовых микрообъектов на просвет [12].

    Одной из тенденций современной интерференционной микроскопии является создание самостоятельных оптических узлов с микрообъективами, реализующих тот или иной вид интерференционной схемы (микрообъектив-интерферометр). Известны такие схемы, реализованные для интерферометров Физо, Миро, Майкельсона и Линника.

    Традиционно расшифровка интерферограмм, полученных на таких микроскопах, производилась вручную. Только в последние десятилетия были предложены и освоены алгоритмы автоматической расшифровки интерферограмм, которые впоследствии были применены и в интерференционных микроскопах. Этому способствовало появлением быстрых ПЭВМ, систем захвата и обработки изображений, высоко чувствительных ПЗС-камер.

    Впервые автоматизированный вариант интерференционного микроскопа Линника МИИ-4 был разработан профессором В.П. Тычинским (1989) и назван “Эйрискан” [13]. В качестве фотоприемного устройства в этом микроскопе используется диссектор. Изображение объекта получается путем развертки. Для реконструкции фазы реализован компенсационный метод (метод временных интервалов). Значение фазы в выбранной точке пропорционально нормированному временному интервалу между моментами регистрации двух минимальных значений интенсивности на фотоприемнике при сдвиге зеркала опорного канала на половину длины волны излучения (). Время съема данных прямо пропорционально зависит от числа отсчетов, в которых производятся измерения и составляет 1мс/пиксель. Т.е. за время одного телевизионного кадра (40мс) регистрируется изображение размером 40 пикселей.

    Известен также автоматизированный вариант микроскопа Хорна (Zicha и Dunn, 1995) [5]. В этом микроскопе используется метод фазовых шагов [14]. Дискретный фазовый сдвиг обеспечивается поперечным перемещением компенсационного клина, управляемого от шагового двигателя. Данный метод получил название DRIMAPS (digitally recorded interference microscopy with automatic phase shifting – цифровая интерференционная микроскопия с автоматическим фазовым сдвигом). Схема микроскопа Хорна сложна в эксплуатации и настройке, так как требует наличия двух идентичных каналов с одинаково приготовленными препаратами: исследуемого препарата и препарата сравнения.

    Среди всех схем наиболее предпочтительна схема интерферометра Линника. Ее преимущества в том, что она позволяет обеспечить:

    • высокое пространственное разрешение, вследствие возможности использования микрообъективов большой числовой апертуры;
    • повышенную чувствительность в измерении ОРХ из-за двойного прохождения света (схема на отражение).

    Нашими специалистами разработан автоматизированный интерференционный микроскоп на базе микроинтерферометра Линника МИИ-4 (М). МИИ-4 (М) серийно выпускается предприятием ЛОМО и предназначен для визуальной оценки и измерения параметров шероховатости отражающих объектов. Принцип и схема микроинтерферометра МИИ-4 впервые были разработаны и применены для исследования качества тонкообработанных поверхностей академиком В. П. Линником.

    Важным достоинством этого интерферометра является возможность работы с широким источником пространственно-некогерентного монохроматического излучения.

    Это свойство приводит к значительному уменьшению когерентных шумов и улучшению, по сравнению с интерферометрами с точечными источниками света, качества получаемых изображений.

    К основным недостаткам относятся: сложности работы и настройки в белом и квазимонохроматическом свете, отсутствие видеорегистрации изображений, расшифровка интерферограмм производится оператором вручную. Это накладывает известные ограничения на точность и время измерений.

    Принцип действия автоматизированного интерференционного микроскопа основан на интерференции световых пучков лазерного излучения, отраженного от опорного зеркала и зеркала, на котором помещен измеряемый фазовый объект. Для автоматизации измерений реализован метод дискретного фазового сдвига (метод фазовых шагов) [14] (см. ниже), вносимого при помощи управляемого от компьютера зеркала на пьезоэлементе (пьезозеркала) в опорном плече микроинтерферометра. Интерферограммы при различных положениях пьезозеркала с помощью встроенной ПЗС-телекамеры окулярного или фотографического канала через плату ввода изображения поступают в персональный компьютер (ПЭВМ), где производится их автоматическая обработка. В результате которой, восстанавливается двумерное распределение оптической разности хода (ОРХ) или фазовое изображение. Результаты измерений отображаются на экране компьютера. Для позиционирования находящегося в поле зрения микроскопа объекта имеется двухкоординатный предметный стол с шаговыми двигателями, управляемый от ПЭВМ через плату управления. На рис. 1. представлена блок-схема прибора. На рис. 2. представлен внешний вид микроскопа.

    Рис.1 Блок-схема автоматизированного интерференционного микроскопа.

    Рис. 2 Автоматизированный интерференционный микроскоп
    1- автоматизированный двухкоординатный предметный стол;
    2 - опорное зеркало на пьезоэлементе;
    3,5 - ПЗС-камеры;
    4 - микроинтерферометр МИИ-4;
    6 - лазерный осветитель с низкой пространственной когерентностью.

    Автоматизация измерений позволила уменьшить погрешность измерения высоты профиля (СКО) до λ/200 и сократить время измерений до 20 с. Применение лазерного источника света упростило настройку интерференционной картины, а также сделало возможным исследование объектов, вносящих большую разностью хода. Низкая пространственная когерентность источника позволила значительно сократить спекл-шум.

    Микроскоп обеспечивает следующие технические характеристики.

    ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

    Линейное поле зрения в плоскости предмета, мкм:

    при визуальном наблюдении с окуляром 15х .................................... 320

    на ПЗС камере окулярного канала .............................................. 145х109

    на ПЗС камере фотографического канала ...................................... 30х23

    Увеличение, крат

    на площадке ПЗС камеры окулярного канала .......................................33

    на площадке ПЗС камеры фотографического канала .........................157

    Максимальная измеряемая глубина рельефа, мкм ....................................20

    Продольная разрешающая способность, в долях длины волны λ …..λ/200

    Поперечная разрешающая способность мкм ..………...................…….. 0,4

    Время измерения и обработки, сек ............................................................ 30

    Число обрабатываемых интерферограмм …............................................... 5

    Операционная система .....................................................Windows 2000/XP

    Автоматизированный интерференционный микроскоп применяется для решения широкого класса измерительных задач в промышленности и биологии. К промышленным измерениям относятся: бесконтактное автоматическое измерение микрорельефа поверхности отражающих объектов (рис. 3), толщины тонких пленок, высотных и шаговых параметров шероховатости и др. Наиболее интересным применением автоматизированного интерференционного микроскопа являются биологические исследования. Наличие интерференционного контраста позволяет изучать живые неокрашенные клетки. К биологическим применениям микроскопа относятся: морфометрические исследования биологических объектов [3], оценка состояния популяции клеток [10], измерение сухого веса клеток [4], измерение параметров двулучепреломления [8], динамические фазовые измерения [4].

    На рис. 3 представлено фазовое изображение эритроцита с параметрами сухого веса и морфометрии: эффективный радиус 4,3 мкм, площадь 58,7 мкм2, масса сухого вещества 48,3 пг;

    Рис. 3 Фазовое изображение эритроцита с параметрами сухого веса и морфометрии.

    Для измерения локальных характеристик внутренних неоднородностей микрообъектов разработаны методы конфокальной сканирующей микроскопии [15,16], оптической когерентной микроскопии [17], а также методы, использующие томографическую реконструкцию. В конфокальном микроскопе изображения внутренних сечений формируются за счет сканирования и пространственной фильтрации излучения. Данный метод пригоден лишь для исследования самосветящихся (флуоресцентных) объектов. Оптическая когерентная микроскопия основана на принципах оптической когерентной томографии и представляет метод оптической локации с использованием низкокогерентного излучения. Изображение сечения получается за счет интерференции света, рассеянного в тонком слое внутри объекта, и опорной волны. Толщина слоя определяется длиной когерентности источника. Метод пригоден для визуализации градиентов показателя преломления сильно рассеивающих фазовых объектов и слоистых структур. Так как в микроинтерферометрии фазовых объектов измеряемым является интегральный параметр – ОРХ, то для реконструкции n(x,y,z) необходимо использовать только принципы томографии.

    Особенность интерференционной вычислительной микротомографии заключается в решении технически сложной задачи встраивания системы сбора проекционных данных в интерференционный микроскоп [18]. Зондирование объекта может осуществлять либо параллельным пучком света, либо расходящимся (коническим). В первом случае формируются параллельные проекции, а во втором – конические.

    Возможные следующие варианты зондирования (рис. 4):

    • поворот пучка зондирующего излучения относительно неподвижного объекта;
    • вращение (наклон) объекта относительно неподвижного пучка зондирующего излучения.

    Рис. 4. Схемы зондирования в микроскопии:
    a-c) со сканированием пучка зондирующего излучения относительно неподвижного объекта;
    d, e) cхемы с движением объекта относительно неподвижного пучка зондирующего излучения.

    Схемы с поворотом пучка относительно неподвижного объекта различаются по траектории, которую описывает зондирующий пучок относительно объекта, или области (сетке), на которой регистрируются проекции. Известны следующие подходы:

    • внеосевая вращающаяся точечная диафрагма в плоскости апертурной диафрагмы микрообъектива [19]. Траектория зондирования – окружность;
    • одномерное смещение точечного источника в плоскости апертурной диафрагмы конденсора и получение наклонного освещения [20]. Траектория зондирования - прямая (1D);
    • использование матрицы микрозеркал DMD (Digital Micromirror Devices), помещенных в апертурной диафрагме микрообъектива, для создания наклонного освещения [21]. Схема может быть использована только для небольших объектов. Траектория зондирования – любая двумерная (2D);
    • двумерное смещение точечного источника в плоскости апертурной диафрагмы микрообъектива и получение наклонного освещения [22-24]. Траектория зондирования – любая двумерная (2D).

    Среди этих схем наибольшее предпочтение имеют схемы, обеспечивающие двумерную траекторию. Все подходы имеют общий недостаток, заключающийся в том, что угол зондирования объекта ограничен числовой апертурой микрообъектива и не превышает 90º.

    Схемы со сканированием объекта относительно неподвижного пучка (micro-axial tomography) реализованы для следующих вариантов вращения:

    • вращение капилляра с находящимся внутри него объектом [25];
    • наклон объекта, помещенного между двумя покровными стеклами.

    Эти схемы обеспечивают большой угол зондирования. Однако для их реализации необходимо, чтобы ось вращения проходила через объект, иначе при вращении он выйдет из области фокусировки. Т.е. необходимо создавать сложные поворотные механизмы, обеспечивающие выравнивание микрообъекта относительно оси вращения.

    В нашей компании были разработаны схемы томографических микроскопов на основе микроскопа Линника, конфокального сканирующего микроскопа и специальный иммерсионный конденсор, для томографического зондирования микрообъекта под большим углом.

    Особенностью томографического микроскопа на основе схемы Линника является то, что эта схема обеспечивает большую числовую апертуру. Угол зондирования с иммерсионным объективом достигал 90º. Для сбора проекционных данных использовалось наклонное освещение с разных ракурсов, достигаемое за смещения точечного источника в плоскости апертурной диафрагмы микроскопа (рис. 5). В результате объект зондировался параллельным пучком по двумерной траектории (2D). Для реконструкции фазы использовался метод фазовых шагов [14], а для томографической реконструкции итерационный алгоритм cART.

    Рис. 5. Томографический микроскоп Линника:
    1 - лазер;
    2,3 - сканирующее устройство;
    4 - сетоделитель;
    5,8 - микрообъективы;
    6 - покровное стекло;
    7 - предметное зеркало;
    9 - пьезоэлемент;
    10 - линза;
    11 - ПЗС-камера;
    12 - ПЭВМ;
    13 - препарат;
    14 - диффузор;
    15 - светофильтр.

    Были проведены экспериментальные исследования микроскопа с клетками крови – эритроцитами и лимфоцитами. На рис. 6 а приведены проекции лимфоцита, а на рис. 6 б реконструированная томограмма лимфоцита.

       

    Рис. 6.
    а - проекции лимфоцита,
    б - томограммы лимфоцита.

    Был разработан томографический микроскоп на основе конфокального сканирующего микроскопа. В основе схемы лежит интерферометр Маха-Цендера, а модифицированная схема конфокального микроскопа встроена в его предметный канал (рис. 8). Особенностью схемы является то, что зондируемый объект находится вне области перетяжки, образуемой конфокальной парой двух идентичных иммерсионных объективов 6 и 7. Объект зондируется конусным пучком, а на регистраторе 16 формируется конусная проекция. Угол зондирования - 100°. Для реконструкции фазы использовался также метод фазовых шагов, реализуемый путем смещения пьезоэлементом опорного зеркала 9. Для сбора проекционных данных использовалась схема сканирования объектом – объект О совершает плоскопараллельное движение вместе со сканирующим предметным столом, управляемым от компьютера.

    Рис. 7. Томографический конфокальный микроскоп:
    1 - лазер;
    2-4 – коллиматор с пространственным фильтром;
    5,10 - светоделитель;
    6,7 – иммерсионные микрообъективы;
    8,9 – зеркала;
    11,12 - поворотные призмы;
    13 - поляризатор;
    14 - объектив;
    15 - точечная диафрагма;
    16 – ПЗС-камера;
    О; О’ –объект и его изображение.

    Получаемый набор конусных проекций используется для томографической реконструкции. Однако возможны два пути восстановления томограммы: либо производить томографическую реконструкцию по конусным проекциям, либо использовать специальный алгоритм пересчета конусных проекций в параллельные проекции. Данный алгоритм заключается в том, что при сканировании объекта в зоне конического пучка за каждый шаг сканирования на детекторе регистрируется один отсчет параллельной проекции. Таким образом, количество таких параллельных проекций определяется числом элементов детектора, траектория зондирования – геометрией расположения этих элементов, а число отсчетов в проекциях – числом шагов сканирования. Данная схема является универсальной и может быть использована и для флуоресцентных объектов. Она защищена патентом России [26].

    Для достижения большого угла зондирования необходимо использовать иммерсионные объективы. Например, если числовая апертура будет равна NA=1,3 и среда, в которой находится объект, физиологический раствор (n=1,33), то максимальный угол будет равен 78º.

    Однако если наклонное освещения объекта проходит через воздух (n=1) и затем попадает в среду, в которой находится объект (n=1,33), то максимальный угол, определяемый числовой апертурой микрообъектива не достигается. Например, даже если угол наклона падающего пучка будет стремится к 90º (косое освещение), то угол в среде будет стремится к 49º (для NA=1,3). Поэтому для того, чтобы достигнуть максимального угла зондирования наклонное освещение должно формироваться в некоторой промежуточной среде с показателем преломления большим, чем значение числовой апертуры микрообъектива.

    Была разработана конструкция зеркального иммерсионного конденсора (рис. 8).

    Рис. 8. Конструкция зеркального иммерсионного конденсора:
    1 - плоское зеркало;
    2,4 - защитные стекла;
    3 - иммерсия;
    5 - корпус.

    Параллельный пучок света, распространяющийся вдоль оптической оси, проходит в промежуточную среду 3 с показателем преломления большим чем числовая апертура иммерсионного объектива и отражается от плоского зеркала 1. Далее наклонный пучок проходит через исследуемый объект, расположенный в центре конденсора на стекле 4 с наружной стороны. После прохождения через объекта пучок попадает в иммерсионный микрообъектив (не показан).

    Конденсор представляет собой оптическое устройство, позволяющее освещать исследуемый объект наклонными плоскими пучками под разными ракурсами. Угол зондирования определяется наклоном зеркал и одинаков для всех ракурсов. Количество ракурсов равно числу зеркал. В изготовленном экспериментальном экземпляре конденсора число зеркал (ракурсов) равно 10. Для того чтобы обеспечить числовую апертуру больше 1 в конденсор заливается иммерсионная жидкость с соответствующим показателем преломления. Заливая жидкости с различными показателями преломления, можно менять числовую апертуру и соответственно угол зондирования. Угол наклона зеркал был рассчитан для NA=1,3 и промежуточной среды n=1,46 (глицерин) и равен 58º. Таким образом, разработанный конденсор позволил получать изображения исследуемого объекта под углом зондирования 156º.

    Литература

    1. Вест Ч. Голографическая интерферометрия. - М.: Мир, 1982.-504 с.

    2. Скворцов Г.Е., Панов В.А., Поляков Н.И., Федин Л.А. Микроскопы. -Машиностроение.- Ленинград.- 1969г.- 512 с.

    3. Метелин В.Б., Минаев В.Л., Валов А.Л., Конрадов А.А., Василенко И.А., Бабакова С.В. Компьютерная фазово-интерференционная микроскопия в биологии и медицине // Сборник научных трудов. -2003.- г.Красноярск.

    4. Левин Г.Г., Ковалев А.А., Минаев В.Л., Сухоруков К.А. Оценка точности измерения сухой массы клетки на автоматизированном интерференционном микроскопе //Измерительная техника.- 2004.- С.62-67.

    5. Dunn G. A. Transmitted-light interference microscopy: a technique born before its time // Proceedings of the Royal Microscopical Society.- 1998.- 33.-P.189-196.

    6. Barer R. Determination of dry mass, thickness, solid and water concentration in livinq cells// Nature.- 1953.-172. - P.1097-1098.

    7. Barer R., Joseph S. Refractometry of living cells. I. Basic principles// Quart.J.Microscop.Sci.. 1954.– 95. – P. 399-423.

    8. Сребницкая Л.К., Вишняков Г.Н., Нейман С.А., Рождественская З.Е., Андреев О.А., Левин Г.Г. Двумерная реконструкция карты двулучепреломления саркомера скелетной мышцы в релаксированном и ригорном состояниях по данным интерференционной микроскопии // Биофизика. – 2001. – Т.46. – Вып. 3. – С. 518-523.

    9. Левин Г.Г., Булыгин Ф.В., Вишняков Г.Н. Когерентные осцилляции состояния молекул белка в живых клетках // Цитология. – 2005. – Т.47. - №4. – С.348-356.

    10. Стрелецкая Е.А., Цыба Н.Н., Козинец Г.И., Левин Г.Г., Вишняков Г.Н. Сопоставление интегральных характеристик лимфоцитов здоровых людей и больных хроническим лимфолейкозом // Клиническая лабораторная диагностика. – 2000. - №4. – С.21-23.

    11. Тычинский В. П. Когерентная фазовая микроскопия внутриклеточных процессов // Успехи физических наук.- 2001.- Т.171.-№6.

    12. Захарьевский А.Н., Кузнецова А.Ф. Интерференционные биологические микроскопы // Цитология.- 1961.- Т.3.- №2.- С.213-224.

    13. Тычинский В.П. Компьютерный фазовый микроскоп.- М.: Знание, 1989.- 64с.

    14. Creath K. Phase-shifting speckle interferometry // APPLIED OPTICS.- 1985.-Vol. 24.- № 18.- P. 3053-3058.

    15. Лежнев Э.И., Попова И.И., Кузьмин С.В., Слащев С.М. Конфокальная сканирующая микроскопия: принципы, устройство, применение (часть 1) // Научное приборостроение.-2001.-Т.11.-№2.- С.3-20.

    16. Лежнев Э.И., Попова И.И., Кузьмин С.В., Слащев С.М. Конфокальная сканирующая микроскопия: принципы, устройство, применение (часть 2) // Научное приборостроение.-2001.-Т.11.-№3.- С.26-42.

    17. Власов Н.Г. Получение изображений на основе использования когерентных свойств зондирующего излучения. // ЖНПФ.- 1999. - т.4. - №5. - С.67-74.

    18. Vishnyakov G.N., Levin G.G, Minaev V.L., Pickalov V.V., Likhachev A.V. Tomographic interference microscopy of living cells //Microscopy and Analysis.-2004.- 87.-p. 19-21.

    19. Kawata S., Nakamura O., and Minami S. Optical microscope tomography. I. Support constraint. - J.Opt.Soc.Am. A, 1987, v.4, pp.292-297.

    20. Vincent Lauer. Observation of biological objects using an optical diffraction tomographic microscope. – Proc. SPIE, 2000, vol. 4164, p. 122 – 133.

    21. Dlugan A., MacAulay C., Lane P. MICROSCOPIC OPTICAL TOMOGRAPHY // 7th Congress of the European Society for Analytical Cellular Pathology, 1-5 April 2001, report Z003. http://www.bccrc.ca/ci/qm01_main.html

    22. Vishnyakov G.N., Levin G.G., Zakerian C.S., Likhachov A.V., Pickalov V.V., Kozinets G.I., Novoderzhkina I.K., Streletskaya G.A. Three – dimensional limited – angle microtomography of blood cells: experimental results // Proc. SPIE.- 1998.- V.3261, P.159-164.

    23. Vishnyakov G.N., Levin G.G., Zakerian C.S. Interferometric computed microtomography of 3D phase objects // Proc. SPIE.- 1997.- V.2984.- P.64-71.

    24. Vishnyakov G.N., Levin G.G. Optical tomography of living cells using phase-shifting Linnik microscope // Proc. SPIE.- 1998.- V.3568.- P.197-200.

    25. Carol J. Cogswell, Kieran G.Larkin, Hanno U. Klemm Fluorescence microtomography: Multi-angle image acquisition and 3D digital reconstruction // Proc. SPIE.- 1996.- V.2655.- P.109-115.

    26. Патент №2140661 (Россия). Способ конфокальной сканирующей трехмерной микроскопии и конфокальный сканирующий томографический микроскоп. Левин Г.Г., Вишняков Г.Н., Булыгин Ф.В., – заявл. 19.03.99.

     

 
  Rambler's Top100